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TOPOGEN TG2000H 說明書

 更新時間:2017-09-20 點擊量:2374

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TopoGEN 公司是一家專門為拓撲酶研究提供試劑和試劑盒。試劑盒可以有效地分析拓撲異構酶 I , II 和旋轉酶,分析細胞內的拓撲抑制以及描繪拓撲異構酶抑制劑的特性。另外公司還提供 DNa c底物,拓撲抑制劑和抗體等。
 

Human Topoisomerase IIα  

人拓撲異構酶IIα

貨號規格
TG2000H-1250 Units
TG2000H-2500 Units

人類拓撲異構酶IIα產品描述(Top2a)

我們使用TopoGEN的員工開發的專有方法來凈化TopoIIα。純化的酶*不含拓撲異構酶I污染物和核酸酶。它改變了兩步中*拓撲異構體的連接數,SDS-PAGE檢測到的主要多肽為170 kDa; 沒有其他條帶在過載凝膠上可見。

拓撲異構酶II質量控制測試

核酸酶污染:通過測試線性kDNA和線性質粒DNA形成來測定。孵育1μg的連接的KDNA或超螺旋的pUC19DNA 4小時。 在37℃(在 topo II測定條件下,有或沒有ATP)。通過在抑制topo II活性的條件下測定超螺旋DNA的松弛來評估與topo I的交叉污染。過量純化的酶在不存在ATP(含和不含Mg ++)的情況下與pRYG DNA一起在37℃下孵育2小時。在這些條件下,不能檢測到pRYG超螺旋DNA的松弛。


當SDS-PAGE凝膠用純蛋白質超載時,觀察到170kDa的單條帶。zui終分數中沒有180 kDa的topo II形式。 (蛋白質濃度從批次變化,但通常在5-50ug / ml的范圍內)。Topo IIa可以以2-10單位/ ul供應(1單位將在30分鐘內在37℃下將0.2ug KDNA脫鹽30分鐘C)。Topo IIa 

的zui終部分 在以下緩沖液中脫離FPLC柱:10%甘油,50mM Tris(pH 7.7),1mM EDTA和EGTA,650M NaCl。拓撲異構酶II測定條件

 

在topo II反應緩沖液(50mM Tris-Cl,pH8.0,120mM KCl,10mM MgCl 2,0.5mM ATP,0.5mM二硫蘇糖醇)中,使用zui終體積為20-30μl的細胞質DNA底物進行蛻膜測定, 0.2μgKDNA。用5μl(每20μl反應體積)終止緩沖液(5%sarkosyl,0.0025%溴酚藍,25%甘油)終止反應。在含有0.5μg/ ml溴化乙錠的1%瓊脂糖凝膠上分析反應產物。當凝膠運行時,可以用手持式紫外線光源輕松監測2.5 kb DNA小環脫氮產物的分辨率。

人拓撲異構酶II

 

運輸和存儲說明:

酶在干冰上運輸,應儲存在-70°C。我們還建議在*次解凍之后將酶等分(反復循環冷凍/解凍會導致活動喪失); 酶活性穩定1-2天(不再)。

 

我們公司zui大優勢是強大的采購,

1:基本什么都能進口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進口的,

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